Тестирование на вич инфекцию


Тест на ВИЧ — Википедия

Сдача крови на анализы

Тест на ВИЧ позволяет выяснить, присутствует ли вирус иммунодефицита человека, его антигены или антитела к белкам ВИЧ в крови, моче или слюне[1]. Анализом на вирусную нагрузку называется определение количества копий РНК вируса иммунодефицита человека в миллилитре плазмы крови, которое позволяет судить о стадии заболевания и эффективности антиретровирусной терапии[2][3].

Разработаны различные принципы тестирования, из них два используются наиболее часто: обнаружение антител и выявление белков, характерных для вируса. Результат теста принято называть положительным (вирус обнаружен), отрицательным (вируса нет) или сомнительным (маркеры вируса есть, но не все, результат не может считаться положительным)[4][5].

Антитела к ВИЧ[править | править код]

Титр антигена р24 и антител при ВИЧ-инфекции:                      антиген р24                      Антитела анти-р24                      Антитела анти-Env

По некоторым данным, у 99 % инфицированных антитела обнаруживаются в течение первых 12 недель (6—12 недели) после первичного контакта с вирусом[6], по другим данным: у 90—95 % антитела к ВИЧ появляются в течение 3-х месяцев после заражения, у 5—9 % — через 6 месяцев, 0,5—1 % — в более поздние сроки[7]).

Период с ложноотрицательным результатом антител называется «периодом окна». Уже в это время инфицированный человек может быть источником инфекции[8].

Первыми выявляемыми антителами являются «gag» (англ. group antigen ) белки ВИЧ — р24 и р17, а также прекурсор р55. Образование антител анти-р24 сочетается со снижением уровней свободного антигена р24, выявляемого в крови до появления антител[9][10]. Вслед за антителами анти-р24 появляются антитела против белков «Env» (англ. Envelope) — gp160, gp120, p88, gp41 и гена «pol» (англ. Polymerase) — p31, p51, p66. Могут определяться также и антитела против генов «vpr», «vpu», «vif», «rev», «tat», «nef»[11][12].

Наиболее изученными антителами являются антитела, направленные против белков «Env» — gp120, gp41. Они разделяются на два класса: тип-специфичные и групп-специфичные. Другая группа антител анти-gp120, участвующая в антител-зависимом цитотоксическом действии (англ. ADCC) и уничтожении инфицированных ВИЧ-клеток CD4+, может уничтожать и неинфицированные клетки, рецепторы которых связаны свободным gp120, циркулирующим в крови — эффект, названный «Innocent bystanders» («Bystander killing»)[13][14].

Тест-системы, определяющие иммунный ответ[править | править код]

Предварительным тестом на ВИЧ является ИФА, определяющий наличие в крови антител, которые вырабатывает организм для борьбы с вирусом. Этот тест обладает высокой надёжностью (около 90 %) и селективностью, хорошо отработанная технология сделала этот тест недорогим (себестоимость около 1 долл. США). Для анализа берётся небольшое количество крови из вены[15].

Существуют также экспресс-тесты для анализа слюны и мочи, которые позволяют проводить тестирование без укола[16]. В России утверждён единственный тест на слюну (околодесенная жидкость) производства США. На родине производителя он прошёл испытания и получил сертификат FDA. В России его испытаниями занимался ГИСК Им. Л. А. Тарасевича в 2009 году[17].

Выработка антител начинается в организме примерно в течение первого месяца после попадания вируса, затем их количество постепенно растёт. Спустя еще два-два с половиной месяца вырабатывается достаточная концентрация антител для надёжного определения. Поэтому во многих странах (в том числе и в России) перед тестированием пациента предупреждают, что достоверный результат определяется спустя 3—6 месяцев после контакта с вирусом (ок. 90—95 % людей спустя 3—4 месяца, 5—9 % людей спустя 6 месяцев, 0,5—1 % людей гораздо дольше).

Если ИФА показал положительный результат, его перепроверяют с помощью более точного теста иммуноблот. Этот тест имеет очень высокую чувствительность и достоверность (99,9 %), но иногда выдаёт ложноположительные срабатывания. Диагноз «ВИЧ-инфекция» ставится лишь при наличии двух положительных результатов одновременно: ИФА и Вестерн-блот (иммуноблоттинг)[15].

Тест-системы, определяющие ДНК вируса[править | править код]

Самым распространённым из этой группы является тест под названием ПЦР (полимеразная цепная реакция). Обладает меньшей точностью (ок. 85 %), чем ИФА, однако может быть использован уже спустя 10 дней после возможной передачи вируса. Применяется в случаях, когда желателен ранний предварительный результат (до истечения 3 месяцев) или иммунный ответ не может служить показателем: у новорождённых, у пациентов, проходивших иммуносупрессорную терапию (отключение иммунного ответа). По результатам ПЦР диагноз не ставится[18].

Новый тест TZA[править | править код]

Сотрудники Питтсбургского университета (University of Pittsburgh) разработали новый высокочувствительный тест для обнаружения скрытых вирусов[19]. Ведущий автор исследования Фалгуни Гупта (Phalguni Gupta) сообщил, что этот тест будет эффективнее и дешевле существующих методов диагностики ВИЧ. Тест назвали TZA – он делается быстрее и крови для него требуется меньше. Принцип действия TZA – поиск гена, который активируется только при репликации вируса. По результатам теста было установлено, что у пациентов, у которых ВИЧ никак себя не проявлял в результате антиретровирусной терапии, резервуары вируса значительно больше – примерно в 70 раз. Однако новый тест не заменит предыдущий полностью, поскольку у Q-VOA и TZA разный механизм действия, и в зависимости от конкретного случая нужно применять подходящий тест[20].

Достоверность результатов анализа[править | править код]

Сомнительным (или неопределённым) результат выявляется в случае, если результат невозможно трактовать как однозначное наличие вируса (например, присутствия в сыворотке крови антител, перекрёстно реагирующих с белками ВИЧ). В таком случае часто рекомендуют пересдать тест через несколько недель или применить более специфические тест-системы.

Ложноположительным результатом называется ситуация, в которой вируса нет, а тест показал положительный результат. Это возможно для теста по методу ИФА, последующая проверка с помощью другой системы подтверждает отсутствие вируса[21].

Ложноотрицательный результат — отрицательный показатель теста при том, что вирус присутствует. Такая ситуация может сложиться, если анализ проводится слишком рано, до истечения 3 месяцев (недостаточно антител в крови для срабатывания)[21]. Отрицательный результат даёт и анализ ПЦР во время проведения терапии против ВИЧ[22], когда концентрация вирусов в крови становится ничтожной, ниже порога срабатывания.

При помощи анализа наличия антигенов вируса или антител к белкам вируса невозможно установить стадию заболевания, определить, находится пациент в терминальной стадии (СПИД) или болезнь находится на более ранней стадии. Тест на ВИЧ лишь показывает наличие вируса или антител к вирусу в организме. Стадия приобретённого иммуного дефицита диагностируется при наличии как минимум двух ассоциированных оппортунистических заболеваний[23].

Социальные аспекты и юридические нормы[править | править код]

Тестирование на ВИЧ очень важно с точки зрения сохранения здоровья человека[24]. Результаты могут повлиять на планирование жизни и карьеры, отношение к собственному организму, сексуальные практики и точку зрения на употребление вредных или опасных субстанций. Вместе с тем результат может стать известен окружающим, а значит, служить причиной для дискриминации[25]: увольнения с работы, развода с супругом, потери близкого человека или друзей, отказа в предоставлении медицинской помощи или других услуг. Часто получение положительного результата теста приводит к сильному стрессу у самого человека. Поэтому решение о тестировании должно приниматься осознанно, без давления и на полностью добровольной основе.

В настоящее время тест доступен в большинстве российских городов. Как правило, тест по желанию пациента можно сделать анонимно и бесплатно. Документы требуются, если пациенту нужна справка с результатом на его имя. Забор крови делают в районных кожно-венерологических диспансерах (КВД), городских СПИД-центрах (организованных во всех городах уровня районного и областного центра) и многочисленных коммерческих лабораториях[26].

Основы законодательства Российской Федерации об охране здоровья граждан от 22 июля 1993 года № 5487-1 устанавливают[27], что для любого медицинского вмешательства необходимо информированное добровольное согласие пациента. Это, в частности, означает, что забор крови не может быть на законных основаниях произведён принудительно. Исключение сделано для пациентов, чьё состояние здоровья не позволяет им выразить свою волю (в этом случае решение принимает медицинский консилиум), и для подростков младше 15 лет (решение принимают законные представители).

Принудительное тестирование каких бы то ни было групп населения бесперспективно с точки зрения сдерживания эпидемии[источник не указан 408 дней] и противоречит соблюдению прав человека. Проведение теста без согласия человека является незаконным в России. Существуют также 4 ситуации, в которых предоставление результатов тестирования на ВИЧ является обязательным (но не насильственным — каждый может просто отказаться от участия[28]:

  1. Донорство крови, других биологических жидкостей и органов.
  2. При устройстве на работу медицинского работника или другого специалиста в учреждение, которое непосредственно обрабатывает или принимает материалы, заведомо содержащие ВИЧ.
  3. Для иностранных граждан — получение виз для проживания на территории России сроком более 3 месяцев.
  4. Тестирование лиц, находящихся в местах лишения свободы в случае наличия клинических показаний (и в этом случае обследование может быть проведено только с согласия пациента).
  1. ↑ National HIV and STD Testing Resources
  2. ↑ Just Diagnosed with HIV AIDS : Understand Your Test Results : Viral Load
  3. ↑ Human Immunodeficiency Virus (HIV) Test
  4. ↑ CDC HIV Counseling with Rapid Tests (неопр.) (недоступная ссылка). Дата обращения 3 октября 2017. Архивировано 20 января 2015 года.
  5. ↑ AIDS map: False negatives and false positives
  6. ↑ HIV Infogram: Update on the HIV Antibody Test Window Period Public Health
  7. ↑ «ВИЧ-ИНФЕКЦИЯ»: клиника, диагностика и лечение. Москва 2000. Под ред. В. В. Покровского. Диагностика ВИЧ-инфекции/ '
  8. Phelps R., Robbins K., Liberti T., Machuca A., Leparc G., Chamberland M., Kalish M., Hewlett I., Folks T., Lee L. M., McKenna M. Window-period human immunodeficiency virus transmission to two recipients by an adolescent blood donor. (англ.) // Transfusion. — 2004. — Vol. 44, no. 6. — P. 929—933. — doi:10.1111/j.1537-2995.2004.03364.x. — PMID 15157262. [исправить]
  9. Raboud J. M., Montaner J. S., Conway B., Haley L., Sherlock C., O'Shaughnessy M. V., Schechter M. T. Variation in plasma RNA levels, CD4 cell counts, and p24 antigen levels in clinically stable men with human immunodeficiency virus infection. (англ.) // The Journal of infectious diseases. — 1996. — Vol. 174, no. 1. — P. 191—194. — PMID 8655993. [исправить]
  10. García F., Quirós E., Bernal M. C., Alados J. C., González M. I., Maroto M. C. Quantification of the levels of p24 antigen and antibodies in human immunodeficiency virus infection // Enfermedades infecciosas y microbiologia clinica. — 1992. — Vol. 10, № 2. — P. 75—78. — PMID 1643142. [исправить]
  11. Chen Y. M., Lin R. H., Lee C. M., Fu C. Y., Chen S. C., Syu W. J. Decreasing levels of anti-Nef antibody correlate with increasing HIV type 1 viral loads and AIDS disease progression. (англ.) // AIDS research and human retroviruses. — 1999. — Vol. 15, no. 1. — P. 43—50. — doi:10.1089/088922299311691. — PMID 10024051. [исправить]
  12. Cruikshank W. W., Doctrow S. R., Falvo M. S., Huffman K., Maciaszek J., Viglianti G., Raina J., Kornfeld H., Malfroy B. A lipidated anti-Tat antibody enters living cells and blocks HIV-1 viral replication. (англ.) // Journal of acquired immune deficiency syndromes and human retrovirology : official publication of the International Retrovirology Association. — 1997. — Vol. 14, no. 3. — P. 193—203. — PMID 9117450. [исправить]
  13. Muthumani K., Choo A. Y., Hwang D. S., Premkumar A., Dayes N. S., Harris C., Green D. R., Wadsworth S. A., Siekierka J. J., Weiner D. B. HIV-1 Nef-induced FasL induction and bystander killing requires p38 MAPK activation. (англ.) // Blood. — 2005. — Vol. 106, no. 6. — P. 2059—2068. — doi:10.1182/blood-2005-03-0932. — PMID 15928037. [исправить]
  14. ↑ How HIV Causes AIDS PubMed
  15. 1 2 ELISA/Western blot tests for HIV
  16. ↑ First Rapid Home-Use HIV Kit Approved for Self-Testing
  17. ↑ FDA approves first rapid, take home HIV test
  18. ↑ Health Care » HIV/AIDS » FAQ: Are DNA HIV tests accurate?
  19. ↑ Can This New Test Detect Dormant HIV? (англ.), Medical Daily (29 May 2017). Дата обращения 30 мая 2017.
  20. ↑ Новый тест обнаружит спящий ВИЧ (рус.). Дата обращения 30 мая 2017.
  21. 1 2 How Often Do False Positive and False Negative HIV Test Results Occur?
  22. ↑ Подходы к профилактике передачи ВИЧ от матери ребёнку
  23. ↑ AIDS Diagnosis | Conditions & Treatments | UCSF Medical Center
  24. ↑ Who is at risk?
  25. ↑ HIV & AIDS Stigma and Discrimination
  26. ↑ Московский городской центр профилактики и борьбы со СПИД (неопр.) (недоступная ссылка). Дата обращения 7 июля 2014. Архивировано 14 июля 2014 года.
  27. ↑ Федеральный закон от 22 июля 1993 года N 5487-1 "Основы законодательства Российской Федерации об охране здоровья граждан"
  28. ↑ Тест на ВИЧ с точки зрения права, Популярно о СПИД

ru.wikipedia.org

когда делать и какой лучше?

У каждого есть ВИЧ-статус, только у одних он положительный, а у других — отрицательный. Однако знать его необходимо, особенно в российских реалиях, когда в стране эпидемия, и уже более одного процента населения живет с вирусом.

Для диагностики вируса иммунодефицита человека существует несколько видов тестов, причем их классификация сложна лишь на первый взгляд, на самом деле она весьма логична. Главное — помнить, что, несмотря на высокую точность анализов, ни один тест не найдет вирус сразу после заражения.

Скрининговые (поисковые) тесты

Они помогают заподозрить инфекцию, но их результаты надо подтверждать другими анализами. Для скрининга используют тесты либо на антитела, либо на антигены/антитела.

ИФА (иммуноферментый анализ).

Этот метод служит не для обнаружения самого вируса, а антител, которые наша иммунная система вырабатывает для борьбы с ним.

Делают его следующим образом: на очищенные части вируса (антигены), зафиксированные в специальной лунке, наносят кровь. Если в ней есть антитела, то образуются иммунные комплексы антиген/антитело, которые вступают в реакцию с красителем, приводя к изменению цвета. Это оценивается качественно (есть/нет реакции) и/или количественно при помощи дополнительной аппаратуры.

Существует несколько поколений ИФА:

  • В первом поколении тестов использовался сам вирус, обработанный ультразвуком, при этом определялись антитела только ВИЧ-1. Анализ обладал невысокой чувствительностью и специфичностью.
  • ИФА второго поколения научили определять антитела как к ВИЧ-1, так и к ВИЧ-2. Материалом служили синтезированные белки, аналогичные настоящим антигенам вируса. Впрочем, тесты первого и второго поколения давно не используются.
  • Следом появились тесты третьего поколения, которые позволяют диагностировать длительно текущую (хроническую) ВИЧ-инфекцию с чувствительностью и специфичностью около 100 %. Однако при острой ВИЧ-инфекции (когда антител мало или совсем нет) их точность считается недостаточной.

Современный ИФА позволяет обнаружить антитела, появляющиеся в крови с 30-го (цифры согласно клиническим рекомендациям Минздрава) дня инфицирования (по данным Центра контроля и профилактики заболеваний в США CDC — c 23 по 90 день).

по теме

Лечение

Как устроены ВИЧ и АРВТ? Объясняем на пальцах

За счет своей простоты и дешевизны этот метод используется чаще всего, в том числе на его основе работают экспресс-тесты.

Если такой тест оказался положительным, результат перепроверяется на тест-системе другого производителя, и в случае положительного результата применяется иммуноблот (смотри ниже).

Самое последнее поколение ИФА — четвертое. И оно уже позволяет проводить комбинированный анализ, одновременно проверяя: есть ли в крови белковые «обломки» ВИЧ (антигены), а также антитела.

Примечательно, что антиген р24 появляется в крови уже через 15 дней (по данным CDC — с 18 по 45 день) после инфицирования ВИЧ, поэтому такой вид анализа позволяет диагностировать ВИЧ-инфекцию раньше.

Так, эксперты из CDC считают комбинированные тесты наиболее предпочтительными для массового клинического использования. А российский Минздрав рекомендует его применять в качестве скринингового в большинстве лабораторий страны. Однако после получения положительного результата его также нужно перепроверять иммуноблоттингом.

Существуют два вида вируса ВИЧ — 1 и 2. В мире наиболее распространен ВИЧ-1. Разновидности вируса различаются по генетическому материалу, по-разному взаимодействуют с иммунитетом и отвечают на лечение.

Подтверждающие тесты

Как следует из названия, они позволяют наверняка убедиться в наличии или отсутствии вируса иммунодефицита у человека. Их минус в сложности и дороговизне.

Иммуноблоттинг помогает проверить результаты скрининговых анализов и уточнить, каким видом вируса инфицирован человек: ВИЧ-1, ВИЧ-2 или обоими. Этот метод обладает высокой точностью, чувствительностью, но дорог и сложен в исполнении. Он является комбинацией ИФА и электрофореза, что позволяет определить антитела к специфическим антигенам ВИЧ-1 (gp160, gp120, gp41). Белки под действием электрического поля располагаются в виде полосок на нитроцеллюлозной мембране.

При положительной реакции антиген/антитело на полосках становится видно потемнение.

ПЦР (полимеразная цепная реакция). Тест способен находить генетический материал ВИЧ (ДНК/РНК), то есть проверяет, есть ли непосредственно вирус в крови. Нуклеиновые кислоты могут обнаруживаться уже на 7-й день после инфицирования (по данным CDC — c 10 по 33 день).

При этом методе в пробирке с помощью различных ферментов многократно дублируется участок ДНК или РНК вируса до таких объемов, что его можно увидеть глазом в виде полосок. Кроме того, ПЦР бывает качественным и количественным. В последнем случае можно отслеживать вирусную нагрузку (концентрацию вируса в крови и других биологических жидкостях) у людей с ВИЧ, оценивая эффект терапии.

А я могу сдать сразу иммуноблот или ПЦР, чтобы узнать свой ВИЧ-статус?

Иммуноблот используют специальные лаборатории центров по борьбе со СПИДом. Пробы крови направляются туда для перепроверки уже положительных первичных скрининговых анализов. Сразу сдать его не получится, даже в платных клиниках.

ПЦР, наоборот, можно сдать в любой момент, но только обратившись в коммерческую лабораторию. В СПИД-центрах его делают также для перепроверки ранее положительного теста. Да, ПЦР позволяет максимально быстро (в течение 7—10 дней после инфицирования) обнаружить ВИЧ, но и у него есть недостатки:

  • высокая стоимость;
  • может обнаружить только ВИЧ-1;
  • в редких случаях выявление низких уровней РНК ВИЧ (например, <1000 копий/мл) может привести к ложноположительному результату.

Этот тест имеет смысл делать если:

  • у человека есть подозрение на острую ВИЧ-инфекцию (высокий риск инфицирования) или в период серологического окна;
  • донорам крови;
  • новорожденным от ВИЧ-положительных матерей

Как тогда правильно проверяться на ВИЧ?

Согласно рекомендациям Минздрава, первоначальным анализом должен быть скрининговый тест ИФА. Если результат оказывается положительным, то в лаборатории, используя тот же образец крови, делают еще один анализ. Если и он «с плюсом», то тогда уже проводят иммуноблот.

Нужно ли повторно тестироваться, если результат анализа отрицательный?

Универсальной рекомендации, увы, нет. Повторные тесты нужны чтобы застраховаться от попадания в период окна, когда в крови еще нет антител и антигенов ВИЧ, а вирус уже проник в организм.

То же самое и с частотой тестирования — она зависит от разных факторов: количества рисков, приема доконтактной (PrEP) и постконтактной (PEP) профилактики, нахождения в группах риска (инъекционные наркопотребители, секс-работники, мужчины, практикующие секс с мужчинами). Однако эксперты рекомендуют проверяться каждые 6—12 месяцев.

Что может влиять на результат теста на ВИЧ?

Анализ на ВИЧ может дать неправильные результаты в следующих случаях:

  • при наличии системных аутоиммунных заболеваний (коллагенозов, васкулитов) и злокачественных опухолей;
  • при тестировании в период серологического окна — когда в крови еще не появились антитела к ВИЧ;
  • из-за ошибки при проведении теста в лаборатории;
  • после вакцинации от гриппа.

У детей, рожденных от ВИЧ-положительных матерей, до восемнадцатимесячного возраста в крови могут сохраняться материнские антитела, что может приводить к ложноположительным результатам.

по теме

Профилактика

Меньше знаешь — крепче СПИД

Кроме того, прием PrEP и PEP могут влиять на точность анализов, так как антиретровирусные препараты уменьшают количество вируса в крови и антител к нему.

В случае с PEP после окончания курса рекомендуется посоветоваться с врачом и подобрать оптимальные сроки проведения анализов. Первый тест обычно проводят через 4—6 недель после контакта с ВИЧ, затем через 3 месяца, при необходимости — через 6 месяцев.

Считается, что крайне важно сдать анализ на ВИЧ перед началом приема PrEP и затем проверяться каждые 3 месяца, уже находясь на PrEP.

На результаты теста не влияют прием пищи и алкоголя или курение. Специальной подготовки перед сдачей анализов на ВИЧ не требуется.

А что с экспресс-тестами?

Они позволяют провериться на ВИЧ, не посещая лабораторию или поликлинику. По сути, это тесты ИФА третьего поколения, которые определяют антитела к ВИЧ-1 и ВИЧ-2 в слюне, моче или крови.

Их рекомендуют делать через три месяца после возможного риска инфицирования (чтобы избежать попадания в «окно»). Но считаются достоверными они с 30-го дня предполагаемого заражения (период появления антител).

На рисунке показано, как быстро в крови появляются сам вирус (его генетический материал РНК) антитела и антигены, а также какие системы тестирования можно применить.

Точность большинства экспресс-тестов при хронической (длительно текущей) ВИЧ-инфекции достаточно высока (> 99 % чувствительности и специфичности), но все равно чуть ниже лабораторных анализов.

Сегодня среди них наиболее популярны тесты слюны (или околодесневой жидкости) и крови. Их можно либо купить самому, либо получить бесплатно в ВИЧ-сервисных организациях.

Если вы сделали экспресс-тест и он оказался положительным, необходимо его перепроверить более точным методом.

Где я могу сделать тест на ВИЧ анонимно и бесплатно?

Можно пойти в местный СПИД-центр, кабинеты анонимного консультирования или в некоммерческие организации (например, фонд «СПИД.ЦЕНТР»). Анализ на ВИЧ бесплатный и анонимный, прикрепление к поликлинике и регистрация не требуются. После сдачи теста выдается идентификационный номер, по которому можно будет узнать результат.

spid.center

Тайна двух полосок. Как работают тесты на ВИЧ?

После выхода известного фильма Дудя большинство ВИЧ-сервисных НКО захлестнула волна желающих провериться. В том числе и СПИД.ЦЕНТР — поток клиентов увеличился почти втрое, а на тестирование пришли люди, раньше никогда не посещавшие открытого пространства фонда на Artplay.

Впрочем, и сам Дудь в помещении нашего фонда протестировался, эти кадры есть в фильме. Белой лопаточкой с пластиковой ручкой он проводит по деснам, затем предъявляет результат — одна полоска. «Здоров!»

Ввиду большого интереса публики, в том числе и клиентов, дошедших до нашего лофта на Нижней Сыромятнической, сегодня мы рассказываем, как устроены эти и другие тесты на ВИЧ. Почему на ручке тестера появляются полоски, насколько такое тестирование достоверно и надежно, а главное — какие альтернативы ему существуют.

Все, что вы хотели узнать о технологии тестирования на ВИЧ-инфекцию, — в одном материале.

Все анализы на ВИЧ предназначены для того, чтобы либо разыскать части вируса, либо зафиксировать реакцию организма на его присутствие. Поэтому, чтобы понять, как работают тесты на ВИЧ, нужно примерно представлять, как устроен вирус и как он себя ведет, оказавшись в клетке.

Вирус ВИЧ — член семейства ретровирусов (Retroviridae). Представители этого семейства выглядят как крохотные круглые частицы, у которых есть оболочка, усеянная особыми белками. При помощи этих белков вирус распознает клетку-жертву и прикрепляется к ней.

Затем оболочки клетки и вируса сливаются, а внутрь клетки попадает содержимое вируса — нуклеокапсид. Нуклеокапсид — это белковая капсула, внутри которой находятся генетическая информация об устройстве вируса — две копии двухцепочечной РНК — и набор ферментов, которые «включают» РНК, когда та окажется в клетке. После слияния вируса с клеткой нуклеокапсид открывается, РНК и вирусные ферменты попадают внутрь, а сам вирус начинает свое черное дело.

Вирион ВИЧ. Реконструкция. Красным показаны белки, с помощью которых вирус присоединяется к клетке.

Тестов на ВИЧ очень много, но их можно разделить на несколько больших типов. Те экспресс-тесты, которыми пользуются большинство ВИЧ-сервисных НКО, устроены по принципу иммуноферментного анализа, или ИФА.

Их задача — определить антитела к ВИЧ, которые организм вырабатывает в ответ на проникновение в него вируса.

Как это работает? Когда вирус ВИЧ попадает в организм, иммунная система человека не сидит без дела. Она начинает продуцировать антитела — иммунные белки, которые помогают организму бороться с инфекцией. Эти белки можно обнаружить во многих биологических жидкостях.

Способов обнаружения таких антител существует много. Но наиболее популярным считается именно иммуноферментный анализ (ИФА). За рубежом этот тест называется enzyme-linked immunosorbent assay, сокращенно — ELISA.

Принцип ИФА основан на реакции «антиген-антитело». У человека берут кровь или жидкость с десен (это не совсем слюна), в которой могут находиться антитела к вирусу ВИЧ.

Затем к ней добавляют реактив с белками вируса ВИЧ, а вернее, антигенами, но не простыми, а «доработанными». Антиген, который используют в реакции, отличается от обычного вирусного белка тем, что к нему «прицепили» химическую метку.

Пока «меченые» антигены плавают в реактиве сами по себе, ничего не происходит. Но если в биологической жидкости есть антитела к ВИЧ, то они соединятся с «мечеными» антигенами и дадут сигнал, который может засечь лаборант или экспресс-тест. Если антител к ВИЧ нет — сигнала не будет.

Напомним: антитела — это частицы, которые организм вырабатывает в ответ на присутствие в нем вируса. Антигены — частицы самого вируса. В данном случае модифицированные.

В экспресс-тестах, которые используются фондом СПИД.ЦЕНТР и многими другими нашими коллегами для бесплатного и анонимного тестирования, антитела тонкой линией нанесены на специальную поверхность, спрятанную под пластмассовым корпусом тестера.

Сначала клиент промокает десневую жидкость лопаточкой, установленной на конце тестера. А как только жидкость собрана, лаборант опускает лопаточку в реагент, который в течение 15 минут поднимается по тестеру, достигая в итоге полоски с антигенами.

Если антитела в десневой жидкости, смешанной с реагентом, были — полоска краснеет.

Как правило, на ручке тестера имеется и вторая полоса — контрольная, она окрашивается в красный всегда. Так что, как правило, отрицательный результат (вируса в организме нет) маркируется одной полоской на рукоятке тестера, а положительный (вирус в организме есть) — двумя.

Экспресс-тестеры на ВИЧ. Слева положительный (две полоски), справа отрицательный (одна) результат.

Две полоски на тестере — это верный признак того, что человек некоторое время назад получил ВИЧ-инфекцию. А стало быть, клиенту срочно нужно обратиться к врачу за терапией — в областной или городской центр СПИД. Там ему будут назначены подтверждающие анализы и прописана антиретровирусная терапия.

Точно такой же тест (ИФА), только лабораторный, можно сделать и во многих коммерческих клиниках — но за деньги. Технология его в целом выглядит так же, а точность отличается незначительно.

Какие бывают тесты ИФА?

●        «Домашний» экспресс-тест — OraQuick HIV ½ Rapid Antibody Test. Материал для теста — жидкость, которую собирают с десен специальной мягкой щеточкой. Тест выдает результат очень быстро: в течение 20 минут.

●        Лабораторный ИФА-тест — анализ на ВИЧ по форме 50. В нашей стране его применяют в качестве стандартной процедуры лабораторной диагностики ВИЧ-инфекции. Материал для анализа — кровь из вены, которую нужно сдавать в лаборатории. Результаты приходят через 1—5 дней.

Что важно знать об ИФА-тестах?

У всех ИФА-тестов есть два серьезных недостатка. Во-первых, ИФА-тесты не определяют вирус ВИЧ сразу после инфицирования. Так происходит, потому что антитела к вирусу ВИЧ вырабатываются не сразу. Современные ИФА-тесты позволяют «засечь» иммунные белки только через 23—90 дней после заражения. Если сдать анализ до этого срока, можно попасть в «серологическое окно» — так называется время, в течение которого иммунная система еще не успела создать антитела к вирусным белкам, хотя вирус в организме уже есть.

Во-вторых, ИФА-тесты на ВИЧ иногда дают ложноположительные результаты — то есть «находят» вирус ВИЧ у людей, у которых его на самом деле нет. Лабораторный ИФА-тест на ВИЧ может ошибаться так же, как и экспресс. Именно поэтому все положительные ИФА-тесты, как правило, подлежат проверке при помощи более надежных методов. В нашей стране с этой целью применяют вестерн-блоттинг.

Подтверждающие тесты: вестерн-блоттинг (WB)

Цель этого теста — подтвердить результаты первичного анализа.

Вестерн-блоттинг можно провести только в лаборатории. Такие тесты не бывают «карманными», именно поэтому все НКО, которые тестируют граждан на ВИЧ, в итоге отправляют своих клиентов в лаборатории центров СПИД сдавать именно этот анализ, если экспресс-тестер показал положительный результат.

Вестерн-блоттинг (или иммуноблот) по технологии — тот же ИФА-анализ, основанный на реакции «антиген-антитело», только очень точный, долгий и кропотливый.

Строение вируса ВИЧ. Схема.

Чтобы провести анализ, у человека берут кровь и добывают из нее сыворотку. Это все та же кровь, только без эритроцитов, иммунных клеток и всего остального, что может образовывать сгустки крови. Потом эту сыворотку наносят на полоску из нитроцеллюлозы, на которой в строгом порядке размещены различные антигены ВИЧ — белки из оболочки и нуклеокапсида вируса. Если в сыворотке крови уже успели появиться антитела, они свяжутся с антигенами, размещенными на полоске.

Потом к смеси добавляют новый реактив-«проявитель». Как и в фотографии, этот реактив нужен, чтобы понять, прошла реакция или нет. В реактиве-«проявителе» находятся антитела, помеченные химической меткой. Но это антитела не к антигенам вируса ВИЧ, а к человеческим антителам, которые умеют связываться с комплексом «антиген-антитело».

Если в образце есть комплекс «антиген-антитело», на полоске проявятся окрашенные полосы. Каждая полоска означает свой вирусный белок. Реакция считается очень точной — в большинстве случаев вестерн-блоттинг позволяет исключить случайное срабатывание теста.

Какие бывают тесты этого типа? Разные. Некоторые позволяют подтвердить наличие вируса ВИЧ-1, некоторые — ВИЧ-2, а некоторые — обоих вариантов вируса сразу.

Пример: российская тест-система ИФА-Лайн-Блот-ВИЧ-1,2. Эта тест-система участвует в тендерах — закупках в государственные лаборатории, которые действуют при СПИД-центрах.

Что важно знать о вестерн-блоте?

В России вестерн-блоттинг считается золотым стандартом подтверждения ВИЧ-инфекции. Проблема заключается в следующем.

1.      Вестерн-блоттинг все равно иногда дает неопределенный результат. В этой ситуации тест придется пересдать, причем только через три недели.

2.      Вестерн-блоттинг дорогой и долгий. Тест требует сложного оборудования, кропотливой работы и квалифицированного персонала. А чтобы разобраться с результатами, нужна помощь эксперта.

В чем проблема с российскими анализами на ВИЧ?

В нашей стране для подтверждения ВИЧ-статуса используют лабораторный ИФА-тест и вестерн-блоттинг — это стандартная процедура. Однако Всемирная организация здравоохранения (ВОЗ) отмечает: в странах, где действует эта схема, на определение ВИЧ-статуса тратится очень много времени и средств. Причем ожидание результата настолько изматывает, что некоторые пациенты даже жалеют о решении узнать свой ВИЧ-статус.

Эксперты ВОЗ советуют отказаться от лабораторных ИФА-тестов и вестерн-блоттинга в пользу комбинированных экспресс-тестов, которые дают быстрый и более надежный результат. И это действительно работает.

Например, в США от «подтверждающего» инфекцию вестерн-блоттинга в принципе отказались. И для определения, и для подтверждения ВИЧ-статуса в этой стране используют комбинированные лабораторные и экспресс-тесты. Это не только дешевле для государства, но и психологически проще для людей: поскольку время ожидания меньше, а сама процедура — проще, все больше американцев вовремя узнают свой ВИЧ-статус и начинают своевременное лечение.

Комбинированные тесты

Цель комбинированных тестов, как и вестерн-блоттинга, — определить ВИЧ-статус человека.

Они представляют собой тот же анализ ИФА, но усовершенствованный — «два в одном». Тест позволяет определить не только человеческие антитела к вирусу ВИЧ, но и вирусный антиген — белок p24. Из этого белка состоит внутренняя оболочка вируса — нуклеокапсид, о котором мы говорили выше.

Комбинированные тесты на ВИЧ тоже бывают «домашними» и лабораторными.

●        Пример «домашнего» комбинированного экспресс-теста — анализ Alere HIV Combo. Этот анализ можно сделать по крови из пальца (по сыворотке тоже, но годится и «простая» кровь), а результаты известны уже через 20 минут.

●        Пример лабораторного комбинированного теста — HIV Ag/Ab Combo, который делают в частных лабораториях за деньги.

Что важно знать об этом тесте? Этот анализ относится к четвертому поколению. На сегодняшний день во всем мире именно он считается оптимальным способом выявления инфекции, потому что недорог и позволяет относительно рано узнать ВИЧ-статус клиента.

Если речь идет об определении ВИЧ-статуса, то в Европе и США чаще всего прибегают именно к комбинированным тестам. Если тест дает положительный результат, нет необходимости проводить подтверждающий анализ, его просто через некоторое время сдают повторно — и это считается достаточно надежным.

Дело в том, что антиген — вирусный белок р24 — появляется в крови уже в первую неделю после заражения, то есть задолго до того, как вырабатываются антитела. Поскольку комбинированный тест определяет антиген, шанс узнать свой статус есть уже через 21—28 дней после предполагаемого инфицирования.

После того как начинают вырабатываться антитела, вирусный белок р24 из крови пропадает. Иногда это происходит уже на вторую неделю, но у 90—95 % инфицированных людей антитела появляются в крови в первые три месяца после заражения.

Предсказать, когда именно появятся антитела, невозможно, ведь организм каждого человека по-своему реагирует на вирус ВИЧ. Но даже если антиген р24 из крови успеет исчезнуть, комбинированный тест найдет если не р24, то как минимум антитела, и все равно даст верный ответ.

ПЦР: самый сложный анализ

Тесты, позволяющие определить непосредственно генетический материал вируса ВИЧ, называются полимеразной цепной реакцией с обратной транскрипцией (ПЦР-ОТ).

Методов полимеразной цепной реакции (ПЦР), при помощи которой можно определять вирус ВИЧ, существует много. Но понять, что именно происходит в пробирке, проще всего на примере ПЦР с обратной транскрипцией (ПЦР-ОТ).

по теме

Общество

Две полоски. Как живут в Москве ЛГБТ-беженцы из Узбекистана

Этот тест позволяет обнаружить РНК вируса ВИЧ в крови. Если немного упростить, то реакция выглядит следующим образом. Сначала в сыворотку, содержащую РНК вируса, добавляют фермент, который «собирает» вирусную ДНК, используя РНК в качестве матрицы, — то есть проделывает почти то же самое, что и вирус, попавший в клетку.

Затем проводят стандартную ПЦР — реакцию, позволяющую увеличить концентрацию ДНК в образце до величин, которые уже можно без труда зафиксировать. Для этого к получившейся ДНК добавляют нуклеотиды — «кирпичики», из которых строится ДНК, — и фермент, который собирает из этих нуклеотидов вторую ДНК-цепочку. Чтобы фермент сработал, все это нагревают до определенной температуры и повторяют множество раз — до тех пор, пока не наберется достаточно ДНК. В таком виде тест можно использовать для определения ВИЧ-статуса человека.

Реакцию ПЦР-ОТ можно провести в режиме реального времени. Это помогает достаточно точно понять, сколько вирусных частиц находится в организме. Обычно для этого в реакционную смесь добавляют кусочек ДНК, помеченный химическим веществом, которое начинает светиться, когда кусок ДНК встраивается в молекулу. Так как этот кусочек ДНК подходит только к одному участку вирусной ДНК, можно подсчитать количество вспышек и понять, сколько же вирусной РНК первоначально было в образце.

Видео: как работает ПЦР-тест

Какие бывают тесты ПЦР? Полимеразная цепная реакция — это чисто лабораторный тест. Экспресс-тестов, основанных на ней, не бывает — ведь в момент, когда ДНК «достраивается», смесь нужно нагревать. А для того чтобы «прочитать» результат, требуется дорогостоящее оборудование.

ПЦР-ОТ — очень чувствительный тест, который способен определять даже очень небольшое количество вируса в крови. Причем достаточно рано: так как при анализе не нужно ждать появления в крови антител и вирусных белков, он «сработает» уже через несколько дней или недель после контакта с ВИЧ.

Но тест этот очень дорогой и сложный. Впрочем, это не единственная причина, по которой его не используют для определения ВИЧ-статуса для всех, хотя и это можно сделать в частной лаборатории за деньги. Дело в том, что тест подходит для определения только одного типа вируса — ВИЧ-1. ВИЧ-2 он не находит. Поэтому анализы ПЦР на ВИЧ обычно используют только для контроля лечения человека, который уже знает свой ВИЧ-статус.

spid.center

Пять простых вопросов о ВИЧ-тестировании

Почему тестирование на ВИЧ – это важно?

Тест на ВИЧ рекомендуется проходить ежегодно, всем людям от 13 до 64 лет (по рекомендации CDC).

Существуют определённые факторы риска:

  • У мужчин, которые занимаются сексом с мужчинами;

  • У партнёров ВИЧ-позитивных людей;

  • У тех, кто занимался незащищённым сексом более чем с одним партнёром после прохождения последнего теста на ВИЧ;

  • У потребителей инъекционных наркотиков (ПИН), которые пользуются общими иглами (или вспомогательными материалами, например ватой) с другими ПИНами;

  • У секс-работников;

  • У людей, которые проходят лечение в связи с ИППП или туберкулёзом.

Люди, которые больше других уязвимы к ВИЧ, могут проходить тестирование 3-6 раз в год.

Пострадавшим от сексуального насилия важно как можно скорее пройти тест на ВИЧ. Также стоит обговорить с врачом возможность приёма постконтактной профилактики (ПКП) – это краткосрочный курс антиретровирусных препаратов, который обеспечит профилактику ВИЧ-инфекции.

Кроме того, совместно сдавать тест на ВИЧ стоит парам, которые готовятся к зачатию или собираются перейти на не-барьерные виды контрацепции.

О тестировании не стоит забывать и тем, кто состоит в моногамных отношениях: вы не можете знать наверняка, верен ли ваш партнёр, употребляет ли он наркотики.

Беременные женщины проходят тестирование в обязательном порядке. В случае положительного результата им назначают лечение, профилактику в родах и после рождения ребёнка, чтобы защитить его от ВИЧ. Эффективнее будет пройти тест не один раз в течение беременности и кормления: история знает случаи, когда ВИЧ-инфицирование происходило уже после зачатия.

Как работает тест на ВИЧ?

Ни один тест не сможет обнаружить ВИЧ на следующий день после инфицирования. Время до выявления ВИЧ-инфекции называется периодом окна. Его длительность варьируется в зависимости от штамма вируса и особенностей организма человека.

Большинство тестов определяет не сам ВИЧ, а антитела к нему: иммунная система начинает вырабатывать их после того, как вирус попадает в организм. У 97% людей антитела к ВИЧ выявляют в срок от 3 до 12 недель после инфицирования. В течение этого срока проверку можно проходить как в лабораторных условиях (ИФА диагностика), так и при помощи домашней тест-системы: по крови или слюне.

Более чувствительные тесты (ИФА четвёртого поколения) выявляют антигены, которые являются частью самого вируса и появляются в достаточном для определения количестве, пока антитела ещё не выработались. Подобные тест-системы показывают результат в срок 2-6 недель после инфицирования.

ПЦР диагностика выявляет не антитела или антигены, а генетический материал вируса. Из-за высокой стоимости и сложности этот метод используется реже других. Он способен показать точный результат в срок от 1 до 4 недель. ПЦР часто используют для ранней диагностики ВИЧ-инфекции у детей, рожденных от матерей с ВИЧ, так как в их крови до 18 месяцев могут сохраняться материнские антитела и обычный тест ИФА малоинформативен.

Что означает отрицательный результат теста на ВИЧ?

Отрицательный результат не обязательно означает, что у вас нет ВИЧ. Это может быть периода окна. Если вы получили отрицательный результат теста в течение трёх месяцев после потенциального инфицирования, проверьтесь ещё раз в течение следующих трёх месяцев.

Если ваш постоянный партнёр сдал тест и получил отрицательный результат – вам также стоит провериться. Вероятность передачи ВИЧ при половом контакте довольно низка (по сравнению, например, с риском при наркопотреблении). В теории, ВИЧ-статус вашего партнёра может не совпадать с вашим, поэтому тест лучше сдавать вместе.

Что означает положительный результат теста?

Обязательно проводится повторный тест ИФА. Если он также дал положительный результат – выполняется иммуноблот. Если он показывает положительный результат – у человека ВИЧ.

Следует начинать лечение сразу после постановки диагноза. Ежедневный (без пропусков, это важно) приём антиретровирусной терапии (АРТ) позволит сохранить здоровье и снизить вирусную наргузку до нулевого уровня – это значит, что человек не сможет передать вирус своему партнёру.

Если ваш тест на ВИЧ дал положительный результат, а тест вашего партнёра – отрицательный, для профилактики стоит использовать барьерную контрацепцию – по крайней мере до тех пор, пока вирусная нагрузка в жидкостях вашего организма не снизится до нуля. Вопрос о возможностях профилактики лучше обсудить с лечащим врачом.

Где можно пройти тест на ВИЧ?

В России можно анонимно и бесплатно сдать тест на ВИЧ и получить консультацию врача до и после тестирования в Центрах по профилактике и борьбе со СПИДом. (Список учреждений по регионам России представлен здесь).

Услуги по анонимному ВИЧ-тестированию также оказывают частные лаборатории.

Рекомендации составлены на основе гида Центров по контролю и профилактике заболеваний США.

spid.center

Тестирование на ВИЧ - Инфекции

Что такое тестирование на ВИЧ?

Вирус иммунодефицита человека (ВИЧ) - это вирус, который вызывает синдром приобретенного иммунодефицита (СПИД). ВИЧ разрушает иммунную систему организма и в конечном итоге приводит к СПИДу. Люди со СПИДом развивают множество заболеваний и «оппортунистических» инфекций (таких как пневмония, туберкулез, рак и кожные инфекции), которые могут в конечном итоге привести к смерти. Предотвращение имеет решающее значение. Лекарства от ВИЧ / СПИДа не существует, но в настоящее время существуют эффективные методы лечения, которые могут резко замедлить процесс заболевания и предотвратить заболевание и передачу ВИЧ. Если вы подверглись воздействию вируса ВИЧ любым способом, его можно легко протестировать, чтобы определить, были ли вы заражены вирусом.

  • Как передается ВИЧ
    • Вирус ВИЧ может передаваться незащищенным половым контактом (вагинальный, анальный или оральный секс), обмена иглами, перелитыми продуктами крови, от матери к новорожденным и профессиональными иглами.
      • Более высокий риск передачи ВИЧ связан с анальным сексом полового члена и использованием игл для инъекций.
      • Более высокий риск передачи ВИЧ связан с большим количеством сексуальных партнеров.

    Вскоре после того, как вирус ВИЧ попадает в организм, он начинает реплицировать со скоростью 10 миллиардов новых вирусных частиц в день. Фактически, именно во время этого раннего всплеска вирусной репликации в течение первого месяца заражения ВИЧ, когда у многих пациентов бессимптомно (не проявляются симптомы), вирус имеет большое количество и более вероятно, что он будет распространяться от одного человека к другому,

    • В глобальном масштабе большинство новых случаев ВИЧ-инфекции приходится на развивающиеся страны, например, в Африке и Азии, где подавляющее большинство случаев передаются половыми отношениями между мужчинами и женщинами (гетеросексуальные отношения).
    • В Соединенных Штатах известно, что большинство случаев передаются гомосексуальными и бисексуальными мужчинами. Среди гомосексуалистов кажется, что приемный партнер во время анального секса подвергается наибольшему риску заражения.
    • Большинство женщин заражаются ВИЧ через гетеросексуальные контакты.

ru.thehealthylifestyleexpo.com

Кратко о тестах и анализах на ВИЧ

Тестирование на антитела к ВИЧ существует с 1985 года.

С того момента технология тестирования пережила значительную эволюцию: появилось много новых и усовершенствованных тест-систем, предназначенных как для исследовательских, так и для клинических целей. Поскольку лечение ВИЧ-инфекции невозможно, если не будет определен ВИЧ-статус, очень важно понимать, какие тесты существуют, и какие у них есть ограничения.

Обычная процедура тестирования

“В 1985 году главной целью тестирования было сканирование запасов донорской крови”, – вспоминает Стив Морин, директор Университета Калифорнии, Сан-Франциско.

На тот момент еще не существовало способов лечения ВИЧ-инфекции. Также никто не знал, всегда ли у человека с ВИЧ развивается СПИД и через какое время это может произойти.

Единственными медицинскими мерами было лечение оппортунистических заболеваний, которые появлялись, когда ослабевала иммунная система. Так что у людей не было мотивации, чтобы узнавать свой ВИЧ-статус.

В то же время, многие люди, которые считали, что у них был риск, хотели узнать, есть ли у них ВИЧ. По словам Морина это привело к

“опасению, что люди, которые хотят узнать о наличии у себя инфекции, начнут сдавать кровь, чтобы им сделали тест”.

Чтобы исключить такую возможность, федеральное и региональные правительства открыли альтернативные кабинеты тестирования, где люди могли бы узнать свой ВИЧ-статус. Опять же основной целью системы здравоохранения при тестировании была “профилактика… чтобы люди не передали вирус кому-либо еще”.

Но с появлением профилактики для предотвращения оппортунистических инфекций, а позднее – антиретровирусной терапии, цели тестирования изменились. Тесты на ВИЧ стали условием для лечения, и заодно, средством профилактики.

Хотя технологии с тех пор сильно изменились, тестирование в целом следует тем же процедурам, что и в 1985 году.

ВИЧ-инфекция подтверждается двумя разными тестами – скрининговым тестом и подтверждающим тестом. В своей недавней статье для Университета Калифорнии в Сан-Франциско исследователь из Университета Мариленда Ниел Константин объясняет, что

“скрининговые тесты обладают очень высокой чувствительностью, в то время как подтверждающие тесты обладают высокой специфичностью. Из-за высокой чувствительности скрининговые тесты могут давать ложноположительные результаты”.

Поскольку для скрининговых тестов есть вероятность ложноположительных результатов, обычно при получении первичного положительного результата берется тот же образец крови и скрининговый тест дублируется второй раз, и если он опять положительный, только тогда проводится подтверждающий тест другого типа. Подтверждающие тесты проводятся только для образцов крови, которые неоднократно дают положительные результаты (являются “реактивными”).

Комбинация из двух разных типов тестов гарантирует, что полученные результаты обладают “высокой точностью”. Константин отмечает, что технические ошибки и редкие биологические факторы нельзя полностью исключить.

Наиболее распространенный скрининговый тест – иммуноферментный анализ (ИФА).

Обычно для него используют в качестве подтверждающего теста иммунный блотинг. Точно такая же технология (диагностика с помощью ИФА и иммунного блотинга) применяется для выявления огромного числа заболеваний, например, для диагностики болезни Лайма. На самом деле иммунологические методы, на которых основаны эти тесты, настолько фундаментальные, что Салли Лиска, глава городской лаборатории здравоохранения Сан-Франциско, называет их “серология 101”.

ИФА используется как первоначальный скрининговый тест по двум причинам. Во-первых, он обладает очень высокой чувствительностью. Во-вторых, он достаточно дешев и прост для применения. Лиска добавляет:

“Обрабатывать образцы с помощью ИФА намного проще. Требуется небольшой объем крови. Процесс менее трудоемкий. Он гораздо более автоматизирован”.

На данный момент различные производители выпускают более 40 различных тест-систем для проведения ИФА на ВИЧ.

Только небольшая часть из них одобрена для применения в США, а некоторые из тестов одобрены только для исследовательских целей. Эти тест-системы используют искусственно созданные белки ВИЧ, которые “ловят” специфические антитела, которые организм вырабатывает в ответ на белки вируса. Как только антитела пойманы, объясняет Константин, они “могут быть определены реагентами, которые применяются вместе с индикатором, например, ферментом, который приводит к изменению цвета”. Изменения цвета считываются машиной, которая и определяет результат.

Иммунный блотинг действует по похожей схеме, но для него используется электрическое поле, которое различает различные компоненты на основе их молекулярной массы. Это позволяет определить антитела к специфическим вирусным антигенам, которые затем изображаются на бумаге как различимые “полоски”. Иммунный блотинг, по словам Лиски:

“Несколько сложнее для проведения… и гораздо более трудоемок”. Иммунный блотинг также менее чувствителен, добавляет она, поэтому он “никогда не должен применятся сам по себе”.

Иммунный блотинг – самый распространенный подтверждающий тест, но были разработаны и другие тесты для этой цели, например, анализ на непрямые флуоресцирующие антитела, или радиоиммунный анализ. “При условии правильного проведения и интерпретации, эти очень специфические тесты не дают ложноположительных результатов”, – пишет Константин.

“Период окна” сразу после инфекции

Главный недостаток тестирования на антитела – это “период окна”, то есть период, который требуется организму, чтобы выработать антитела в ответ на инфекцию. Стандартные тесты на ВИЧ не определяют вирус сам по себе, но антитела, которые вырабатывает организм. До того, как в организме выработаются антитела, у человека может быть ВИЧ, и вирус может передаваться другим людям, но при этом тест на антитела к ВИЧ будет отрицательным.

Когда первые тесты на ВИЧ были одобрены, период окна варьировался от 6 до 12 недель, но более современные технологии позволяют определить более низкий уровень антител, и поэтому тесты могут дать положительный результат и раньше.

“Современные тест-системы могут определить ВИЧ-инфекцию через 3-5 недель у большинства людей”, – пишет Константин. – “Это верно, как для всех тест-систем ИФА, так и для экспресс-анализов. Некоторые тесты чаще показывают положительный результат через 3 недели, но в целом они все эквивалентны”. Однако он объясняет, что это “зависит от человека (у которого антитела могут вырабатываться не так быстро, как у других)”.

Тесты, не использующие кровь

Ранее все тесты проводились на крови. Недавно были разработаны тест-системы для определения антител в слюне и моче. Оральный тест – OraSure, первый был одобрен для применения в США, следует протоколу скрининга/подтверждения, как и другие тесты на ВИЧ. Это не совсем тест на слюну, для него используется небольшой соскоб жидкости с десен.

Главное преимущества таких тестов – неинвазивная процедура, которая более комфортна для многих пациентов, а также такие тесты можно использовать в местах, где забор крови невозможен по санитарным или практическим соображениям. Тесты на мочу также были разработаны, но они не привлекают такого внимания как тесты на слюну, так как не было одобрено подтверждающего теста на мочу, и для подтверждения результата все равно нужно сдавать кровь.

Экспресс-тесты на ВИЧ

Другой инновацией стали экспресс-тесты на ВИЧ. При использовании обычных тестов образец крови посылается в лабораторию, и в результате пациент может прождать неделю прежде чем получить результат. Экспресс-тесты делаются на месте, и результат можно получить в течение получаса. Как и в случае с ИФА, положительный результат нуждается в подтверждающем тестировании иммунным блотингом.

Преимущества экспресс-тестов в том, что они исключают ситуацию, когда пациент не возвращается за результатом. В анонимных кабинетах тестирования на ВИЧ уровень не возвращающихся пациентов довольно низок, но в таких учреждениях как клиники по лечению ИППП, около 30% пациентов не приходят, чтобы узнать результат.

Согласно Константину, экспресс-тесты

“показали такую же точность, как и ИФА, при условии, что они выполняются осторожно и квалифицированным персоналом. Возможность совершения технической ошибки для таких тестов, как ни парадоксально, выше, потому что процедура кажется слишком простой, и пользователь может стать небрежным при его проведении”.

Чтобы решить эту проблему многие экспресс-тесты обладают сейчас встроенными системами контроля, которые должны определить, соблюдена ли процедура тестирования.

Определение острой стадии ВИЧ-инфекции

Вскоре после инфицирования ВИЧ у некоторых пациентов развивается острая (или “первичная”) ВИЧ-инфекция – период заболевания с симптомами, похожими на грипп, например, лихорадкой. Аналогичные симптомы может вызвать грипп и многие другие инфекции. Многие ученые считают, что в этот период человеку нужно назначить лечение, при условии, конечно, что был поставлен верный диагноз. В то же время лечение острой ВИЧ-инфекции остается спорным вопросом.

На данный момент для подтверждения подозрений на острую ВИЧ-инфекцию рекомендуется тестирование на РНК ВИЧ (ПЦР, тест на вирусную нагрузку). Обычный тест на антитела не определит острую ВИЧ-инфекцию, так как она проходит в “период окна”, когда антитела еще не производятся.

Тесты на вирусную нагрузку могут давать ложноположительные результаты. Тем не менее, анализ данных исследований, опубликованный еще в 1999 году в журнале “American Family Physician” говорит, что вполне возможно достаточно точное определение острого периода: “Во время периода острой ВИЧ-инфекции тест на вирусную РНК показывает результат более 50 000 копий/мл. Было зарегистрировано три случая ложноположительных РНК-тестов на ВИЧ-1, но во всех случаях пациенты были бессимптомными, и вирусная нагрузка была у них менее 2 000 копий/мл. Присутствие высокого титра РНК ВИЧ-1 (более 50 000 копий/мл) в отсутствие антител к ВИЧ позволяет диагностировать острую ВИЧ-инфекцию”.

На настоящий момент ни один тест на вирусные частицы не был одобрен для постановки диагноза ВИЧ-инфекция у пациентов. Тем не менее, в США одобрен тест на вирус для скрининга больших объемов донорской крови. Если тест на вирусную нагрузку недоступен, при подозрении на острую ВИЧ-инфекцию рекомендуется тестирование на антиген p24 – вирусный белок. В любом случае, как только закончится срок для “периода окна” диагноз должен быть подтвержден стандартным тестированием на антитела.

ИФА с пониженной точностью 

В научных целях могут использоваться тест-системы ИФА, чья точность была намерено занижена. Такие тесты используются потому, что уровень антител после инфицирования следует определенной и предсказуемой схеме. Через 4-6 месяцев после передачи ВИЧ этот уровень резко поднимается, а затем достигает постоянного уровня – плато – который остается неизменным на протяжении многих лет.

Современные тест-системы ИФА могут определить очень низкий уровень антител. ИФА с пониженной точностью больше не используются для диагностики среди пациентов. Однако их могут применять ученые и врачи, чтобы понять, произошла ли передачи вируса недавно, или это давняя инфекция. Если инфекция недавняя, то менее чувствительный тест, который становится положительным только к 6 месяцам, сможет это показать.

Константин суммирует свой обзор, говоря, что между различными и эпидемиологическими институтами был достигнут полный консенсус в отношении тестирования на ВИЧ:

“Тесты на антитела обладают чувствительностью практически на 100%, и специфичностью примерно на 99%”.

Такой уровень точности тестирования был показан в большом количестве исследований, включая регулярные оценки достоверности коммерческих тест-систем, поступающих на рынок, которые проводит Всемирная организация здравоохранения.

Эта аннотация была написана Брюсом Миркинемом для Центра по контролю заболеваемости и профилактике США (CDC) в связи с изменениями в официальных руководствах по тестированию в этой стране. В этой статье говорится о надежности тестов и новых системах тестирования, которые не так давно начали регистрироваться в США. 

lasky.ru

Тестирование на ВИЧ | H-Clinic

Для начала хорошо запомним, или вспомним, одну важную мысль: «тестирование на ВИЧ» не равно «диагностика ВИЧ-инфекции». Тестирование, или скрининг на ВИЧ-инфекцию, позволяет надежно, быстро и дешево убедиться, что у человека нет ВИЧ-инфекции в данный момент, или же ставит вопрос о необходимости дальнейших лабораторных исследований. Более – ничего. Потому не бывает положительных тестов на ВИЧ, точнее не стоит так говорить, бывают реактивные тесты, те, что прореагировали, и нужно разобраться, что там прореагировало.

Для скрининга сегодня используют ИФА-тесты (иммуноферментный анализ). Иногда вы встретитесь с ИХА, фактически это очень близкая технология, но адаптированная для «полевых» условий, то, что обычно выпускается в виде так называемых «аптечных» тестов, экспресс-тестов. Тесты делятся на поколения: сегодня на рынке есть тесты 3 и 4 поколения. Отличаются они тем, что тест 4 поколения детектирует не только защитные белки организма (антитела) к ВИЧ, но и непосредственно белки вируса (вирусный антиген).

В некоторых странах, например, в США для скрининга на ВИЧ начинают использовать методы молекулярной диагностики (ПЦР, полимеразная цепная реакция), при помощи которых непосредственно детектируется РНК или провирусная ДНК вируса.

И теперь важный вопрос, который интересует людей очень часто: «Как скоро после потенциального риска инфицирования ВИЧ можно исключить ВИЧ-инфекцию?». 

Взгляды специалистов H-Clinic тут абсолютно не отличаются от консенсусного мнения специалистов развитых стран и экспертов ВОЗ:

  • Тест-системы ИФА 3 поколения, в том числе так называемые экспресс-тесты, или «аптечные» тесты, — надежно исключают ВИЧ-инфекцию через 12 недель от предполагаемого риска и далее;
  • Лабораторные тест-системы ИФА 4 поколения — 6 недель от предполагаемого риска и далее;
  • Ультрачувствительные методы молекулярной диагностики, ПЦР РНК ВИЧ — 4 недели от предполагаемого риска и далее.

Именно такая позиция сформулирована в большинстве национальных и наднациональных руководств несколько лет назад. Именно такая позиция отражена в документах Всемирной организации здравоохранения, IUSTI (Европейский союз), HAS (Франиця), BASHH/EAGA, BHIVA, NHS (Великобритания), DAH (Германия), Public Health Agency of Sweden и RAV (Швеция), Sundhedsstyrelsen (Дания), Israel AIDS Task Force (Израиль), BC Centre for Disease Control (Канада), CDC (США)… При желании данный список можно продолжать.

Мы рекомендуем тестироваться на лабораторных ИФА-системах 4 поколения. Отрицательный тест в таком случае гарантирует у вас отсутствие ВИЧ по состоянию на 6 недель перед тестом.

Реактивный ИФА-тест однозначно требует обращения к квалифицированному специалисту, который назначит исследования, позволяющие исключить или же установить диагноз ВИЧ-инфекции.


Возврат к списку

h-clinic.ru

Тестирование на ВИЧ | Тестирование и лечение ВИЧ в Ленинградской области

Скрининговый тест на ВИЧ

Существует три вида экспресс-тестов, которые определяют наличие вируса в слюне, в крови, в моче. В проекте используются тесты HIV (1&2) InTec Products. Тест определяет наличие антител к вирусу иммунодефицита человека по крови, для этого берется 2 капли крови из пальца. Тест основан на принципах иммунохроматографии и может дать результат в течение от 1 до 15 минут. По результатам тестирования 2016 года данная марка тестов имеет чувствительность - 100%, специфичность 100%. Все положительные результаты должны быть подтверждены использованием альтернативных тестов (ИФА, иммуноблот). Этот тест АНОНИМНО, БЕСПЛАТНО, БЫСТРО вы можете сделать в пунктах экспресс-тестирования организованных в рамках проекта.

Предварительный тест на ВИЧ

Определяет наличие в крови антител, которые вырабатывает организм для борьбы с вирусом. Этот тест обладает высокой надёжностью (около 90 %) и селективностью, хорошо отработанная технология сделала этот тест недорогим. Для анализа берётся небольшое количество крови из вены. Выработка антител начинается в организме примерно в течение первого месяца после попадания вируса, затем их количество постепенно растёт. Спустя два-два с половиной месяца вырабатывается достаточная концентрация антител для надёжного определения. Если ИФА показал положительный результат, его перепроверяют с помощью более точного теста иммуноблот. Данный тест можно бесплатно сдать в поликлинике где вы наблюдаетесь.

Подтверждающий тест на ВИЧ

Определяет наличие антител к индивидуальным белкам вируса. Для анализа берётся небольшое количество крови из вены. Этот тест имеет очень высокую чувствительность и достоверность (99,9 %), но иногда выдаёт ложноположительные срабатывания. По рекомендации ВОЗ иммуноблот используется при диагностике ВИЧ-инфекции в качестве дополнительного экспертного метода, который должен подтверждать результаты ИФА. Обычно этим методом перепроверяют положительный результат при ИФА. ДИАГНОЗ ВИЧ-ИНФЕКЦИЯ СТАВИТСЯ ЛИШЬ ПРИ НАЛИЧИИ ДВУХ ПОЛОЖИТЕЛЬНЫХ РЕЗУЛЬТАТОВ ОДНОВРЕМЕННО: ИФА И ИММУНОБЛОТА. Если у вас положительный тест ИФА вас бесплатно направят на этот тест в вашей поликлинике.

aids47region.ru

когда делать и какой лучше?

 

А я могу сдать сразу иммуноблот или ПЦР, чтобы узнать свой ВИЧ-статус?

Иммуноблот используют специальные лаборатории центров по борьбе со СПИДом. Пробы крови направляются туда для перепроверки уже положительных первичных скрининговых анализов. Сразу сдать его не получится, даже в платных клиниках.

ПЦР, наоборот, можно сдать в любой момент, но только обратившись в коммерческую лабораторию. В СПИД-центрах его делают также для перепроверки ранее положительного теста. Да, ПЦР позволяет максимально быстро (в течение 7—10 дней после инфицирования) обнаружить ВИЧ, но и у него есть недостатки:

  • высокая стоимость;
  • может обнаружить только ВИЧ-1;
  • в редких случаях выявление низких уровней РНК ВИЧ (например, <1000 копий/мл) может привести к ложноположительному результату.

Этот тест имеет смысл делать если:

  • у человека есть подозрение на острую ВИЧ-инфекцию (высокий риск инфицирования) или в период серологического окна;
  • донорам крови;
  • новорожденным от ВИЧ-положительных матерей

Как тогда правильно проверяться на ВИЧ?

Согласно рекомендациям Минздрава, первоначальным анализом должен быть скрининговый тест ИФА. Если результат оказывается положительным, то в лаборатории, используя тот же образец крови, делают еще один анализ. Если и он «с плюсом», то тогда уже проводят иммуноблот.

Нужно ли повторно тестироваться, если результат анализа отрицательный?

Универсальной рекомендации, увы, нет. Повторные тесты нужны чтобы застраховаться от попадания в период окна, когда в крови еще нет антител и антигенов ВИЧ, а вирус уже проник в организм.

То же самое и с частотой тестирования — она зависит от разных факторов: количества рисков, приема доконтактной (PrEP) и постконтактной (PEP) профилактики, нахождения в группах риска (инъекционные наркопотребители, секс-работники, мужчины, практикующие секс с мужчинами). Однако эксперты рекомендуют проверяться каждые 6—12 месяцев.

spid.center

Вопросы по тестированию на ВИЧ

Какие бывают тесты ВИЧ?

Для скрининга (т.е. быстрого и массового тестирования) применяется метод ИФА или ИХЛА. Для подтверждения диагноза применяется иммуноблот.

Для выявления ВИЧ в некоторых ситуациях применяется качественный (т.е. есть или нет, без ответа на вопрос «сколько?») ПЦР РНК или провирусной ДНК ВИЧ, но данный метод является на сегодня вспомогательным и его не следует использовать для скрининга ВИЧ-инфекции.

У лиц с диагностированной ВИЧ-инфекцией применяется количественный метод ПЦР на РНК ВИЧ, он позволяет ответить на вопрос сколько вируса в крови. Его так же не следует применять для диагностики.

Когда после риска нужно сделать тест на ВИЧ?

Оптимально сделать два теста: через 6 недель и через 12 недель (3 месяца, если округлить до целых месяцев) после риска — достоверность отрицательного результата будет предельно близка к 99,9 %. Тест через любой более длительный срок тоже будет достоверен.

На любых сроках от потенциально опасной ситуации после 6-12 недель ИФА не увеличивает и не теряет своей надежности, оставаясь точным методом диагностики и через год, и через два и далее. В очень редких случаях диагностические проблемы могут возникать у очень тяжелых, фактически терминальных пациентов, с развернутой картиной СПИДа. Подробнее можно почитать об этом здесь, также там даны ответы на вопросы о т.н. поздней сероконверсии.

Где я могу пройти тест на ВИЧ?

Существует много мест, где вы можете пройти тест на ВИЧ: в поликлинике, в кабинете частного врача, больницах, клиниках планирования семьи и в местах, специально отведенных для тестирования на ВИЧ.

Всегда старайтесь пройти тестирование там, где проводится консультирование. В некоторых местах имеются услуги по консультированию и тестированию на дому, которые могут включать консультирование пар и оказание им поддержки для безопасного раскрытия результатов после тестирования.

Какой нужно сделать тест?

ИФА или ИХЛА тест на ВИЧ. Это название технологии теста. Конкретное название оборудование будет написано на упаковке теста, например, Abbot ARCHITECT HIV Ag/Ab Combo.

Зачем делать тест через 6 недель, если всё равно нужно будет делать через 12? Можно обойтись только одним тестом через 12 недель?

Да, можно. Первый тест даст уже очень высокую предварительную достоверность, что важно для диагностики, и, кроме того, при отрицательном результате позволяет легче переждать срок до финального теста через 3 месяца.

Что такое период (серонегативного) окна?

Это период между заражением ВИЧ и появлением обнаруживаемых антител к вирусу.

В течение «периода окна» в крови ВИЧ-инфицированных людей нет антител, которые можно обнаружить с помощью теста на ВИЧ. Тест на ВИЧ отрицателен. Однако, в жидкостях организма человека, таких как кровь, семенная жидкость, влагалищное отделяемое и грудное молоко, уже может отмечаться высокий уровень ВИЧ.

ВИЧ может передаваться другим людям во время периода окна, даже если тест на ВИЧ не показал, что у вас ВИЧ-инфекция.

Какова достоверность теста через 6 недель после риска?

Для тестов, определяющих и антитела и антигены — практически полная, для тестов только на антитела — примерно на уровне 95%.

Если ИФА положительный, то это означает диагноз ВИЧ-инфекции?

Нет, требуется подтверждение другим методом. Подтверждающим методом для диагностики ВИЧ-инфекции сегодня является непрямая иммунофлюоресценция (РНИФ, иммуноблот, вестерн-блот). Иммуноблот демонстрирует высокую чувствительность (99,3 — 99,7 %) и специфичность (99,7 %), но так как метод определяет иммуноглобулины класса G, то с момента инфицирования результат может быть ложноотрицательным до трех недель.

У меня первый (второй третий, сорок шестой) ИФА тест на ВИЧ положительный, а иммуноблот отрицательный. Что это значит?

Это значит, что ВИЧ у Вас нет.

У меня иммуноблот сомнительный (неопределенный). Что это значит?

Вам необходимо повторить иммуноблот через 2-3 месяца после первого. Если он будет отрицательным или останется неопределенным, то ВИЧ можно исключить. Иммуноблот может быть отрицательным или сомнительным сразу после инфицирования в пределах 4-8 недель, именно для этого его нужно повторить.

Проверочный иммуноблот оказался положительным. У меня ВИЧ? Ошибки быть не может?

Да, у вас, к сожалению, ВИЧ. Не может.

У меня отрицательный тест через 3 месяца, но у меня продолжаются непонятные симптомы, у меня ВИЧ?

ВИЧ у Вас нет. Ваши симптомы к ВИЧ отношения не имеют. С любой непонятной симптоматикой нужно обращаться к врачам очно.

Есть ли возможность узнать о наличии или отсутствии ВИЧ раньше?

Да, возможно. Первый ИФА (ИХЛА) Ат+Аг тест можно сделать уже через 3 недели после риска, его достоверность будет высокой. Если есть лишние деньги, то можно сделать тест ПЦР ДНК качественный на ВИЧ через 2 недели после риска, его результат тоже даст высокую предварительную достоверность.

Я сдавал тест через 1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11,12 месяцев после риска. Они все отрицательные. Но я плохо себя чувствую, у меня чешется левая пятка и зудит под левой подмышкой. У меня точно ВИЧ, я уверен, просто тесты его не показывают!

ВИЧ у Вас нет. Со СПИДофобией нужно обратится к психиатру очно.

В чем разница между ИФА и ИХЛА? Что информативнее?

Иммуноферментный анализ (ИФА) и иммунохемилюминесцентный анализ (ИХЛА) это два способа забить гвоздь, большим красным, или средним зеленым молотком. Результат один и тот же — взаимодействие антигена с антителом или отсутствие такового. Т.е. информация — забитый гвоздь — в итоге одна и та же.

Обычно указания на ИХЛА в отношении диагностики ВИЧ носит характер артефакта, и на самом деле речь идет об ИФА. Т.е. с одной стороны — разницы нет, с другой — правильнее оперировать не названием метода, а названием тест-системы.

Как узнать поколение теста, определяет ли он антиген?

Антиген определяется, если известно, что это тест 4-го поколения, если в названии теста фигурируют слова или буквы: антиген, antigen, аг, ag.

Какие поколения тестов сейчас используются? Могут ли это быть старые тесты 2-го поколения?

Все современные тесты — это тесты 3-го (без антигена) или 4-го (с антигеном). Более старые тест-системы не производятся и не используются уже как минимум лет пять. Все современные тесты дают полную достоверность через 12 недель после риска, независимо от их обозначений и поколений.

Что такое тесты 4 поколения? Чем отличается разные поколения ИФА?

Тесты 4 поколения детектируют ВИЧ-инфекцию раньше, так как «видят» не только антитела, как тесты 3 и более ранних поколений, но и антиген ВИЧ. Антитела вырабатываются организмом в ответ на ВИЧ-инфекцию, и на выработку нужно некоторое время. Антиген ВИЧ p24, это белок вирусного капсида, а именно непосредственно кусочек вируса. Понятно, что он начинает определяться в крови ранее, чем антитела — белки иммунной системы человека, которые вырабатываются в ответ на ВИЧ-инфекцию. Т.е. «период окна» для теста 4 поколения совсем небольшой. Когда начинают обнаруживаться в большом антитела против ВИЧ, антиген p24 часто уже не выявляется, вероятнее всего в результате образования комплекса между антигеном и антителами в крови. В случаях его обнаружения антиген p24 является высокоспецифическим индикатором инфекции.

Какого поколения был мой тест?

Для Российской Федерации — четвертного, иных у нас не ввозится и не используется. В названии теста обычно присутствует что-либо из: «Combo», «At/Ag», «АТ/АГ» или «p24».

Выявляет ли ИФА тест 4 поколения ВИЧ-2?

Да, все современные специализированные ИФА-системы выявляют ВИЧ-1 и ВИЧ-2.

Какой период «окна» для тестов 4 поколения (Ag/At Combo)?

Тест-системы 4 поколения способны обнаружить не только антитела к ВИЧ, которые организм вырабатывает в ответ на инфекцию, но и непосредственно ВИЧ, посредством выявления вирусного белка p24. Белок p24 может быть определен очень рано, но его уровень в крови в период после инфицирования постепенно снижается, но одновременно с этим снижением нарастает уровень антител. Все люди разные, потому назвать точный 100% минимальный срок, когда сомневаться в тесте уже нет поводов — невозможно. Однако, на сегодня есть достаточное количество исследований, которые дают нам весьма определенные ориентиры, приведем лишь несколько из них:

Итак, у нас достаточно данных считать, что лабораторные ИФА-системы 4 поколения с очень высокой вероятностью «не пропустят» ВИЧ-инфекцию уже через месяц поле инфицирования.

Так все же, с какого срока ИФА 4 поколения совершенно надежно исключает ВИЧ?

Тест 4 поколения может в отдельных случаях выявлять ВИЧ-инфекцию уже через неделю после инфицирования, но ориентироваться на это все же нельзя, потому как это скорее исключение. Как Вы видели выше — месяц вполне надежный срок для современных лабораторных тест-систем.

Я тестировался на разных сроках, в том числе и через 6-8 недель, и через 12 недель (3 месяца после возможного контакта) и не могу успокоиться, потому как наблюдаю различные симптомы, в некоторых результатах анализов есть отклонения и т.д. и т.п. Что делать? Что мне еще сдать?

Ничего, в данном случае вы имеете дело с неким иным заболеванием, и скорее всего с тревожным или тревожно-депрессивным расстройством. Получите консультацию квалифицированного инфекциониста, а затем, если инфекционная или иная природа будет исключена, то обратитесь за помощью к психотерапевту или психиатру.

Что такое специфичность и чувствительность?

Специфичность диагностического теста – это доля верно определенных тестом заведомо отрицательных образцов.

Иначе говоря, для определения специфичности теста необходимо взять несколько тысяч заведомо здоровых людей и проверить их при помощи теста. Если на каждые 1000 образцов будет получено 10 ложных положительных результатов – то специфичность теста составит: (1000-10)/1000*100%=99%. Если количество ложных срабатываний больше, то специфичность становится меньше (т.е. хуже). Так, специфичность теста 99% означает примерно 10 ложных позитивных результатов на 1000 проверенных здоровых людей.

Внимательно изучите инструкцию и материалы предлагаемых на рынке тестов, найдите информацию о том, каким образом была проверена специфичность. Как правило, это данные по испытаниям нескольких тысяч образцов, полученных из разных географических регионов.

Чувствительность диагностического теста – это доля верно определенных тестом заведомо положительных образцов.

Иными словами, если мы возьмем 100 достоверно ВИЧ-инфицированных людей, проверим их тестом и получим 100 положительных результатов, то чувствительность теста будет равна 100%. Практически у всех тестов на рынке чувствительность 100%.

Нельзя путать понятия точности выявления положительных и отрицательных образцов. Точность выявления положительных образцов — это чувствительность теста, а точность выявления отрицательных образцов — это специфичность.

Чувствительный тест часто дает положительный результат при наличии заболевания (обнаруживает его). Однако, особенно информативен он, когда дает отрицательный результат, т.к. редко пропускает пациентов с заболеванием. Пример — ИФА.

Специфичный тест редко дает положительный результат при отсутствии заболевания. Особенно информативен при положительном результате, подтверждая (предположенный) диагноз. Пример — иммуноблот.

Логично использовать для скрининга (быстрого и дешевого тестирования большого числа пациентов) максимально чувствительный вид тестов, а вот для установления диагноза — максимально специфичные методы. Именно поэтому ИФА исторически является скрининговым, а иммуноблотом подтверждается ВИЧ-инфекция.

Важно понимать, что ложные положительные результаты существуют у всех тестов, никакой тест не может давать 100% специфичности! Результаты экспресс-тестов подлежат особой проверке и перепроверке в лабораторных условиях при помощи других методов. Результаты лабораторных ИФА тестов подлежат перепроверке методом иммуноблотинга.

Может ли тест быть ложноположительным?

Да, может. В этом случае в обязательном порядке необходимо сделать проверочный тест иммуноблот, который точно покажет есть у человека ВИЧ или нет.

По каким причинам тест на ВИЧ может быть ложноположительным?

Причин много и все они не известны. Самая частая причина — беременность, также такую вероятность несколько увеличивает недавние вакцинирование некоторыми иммунопрепаратами.

Может ли тест быть ложноотрицательным?

Может, если он сделан в период окна, который длится до 3-х месяцев после риска инфицирования.

Каковы причины ложноотрицательного результата в тесте на ВИЧ?

Ложноотрицательный результат, а точнее существенное удлинение «периода окна», может вызвать начатая очень рано после инфицирования антиретровирусная терапия или постконтактная профилактика, прием средств, подавляющих иммунитет (иммунодепрессантов, например, после пересадки органов и др.), а также некоторые тяжелые заболевания иммунной системы.

Но, нужно понимать, что тесты 4-го поколения определяют не только антитела, но и антиген p24, который является белком вирусной оболочки, т.е. эти тесты определят ВИЧ-инфекцию, даже если антитела по каким-то причинам задерживаются.

Алкоголь, иные психоактивные вещества, любая пища, БАДы, иммуностимуляторы, иммуномодуляторы, антибиотики и любые иные препараты, стресс, полнолуние, созерцание белого коня, усталость, общая болезненность и ослабленный иммунитет, грипп, ангина и прочие заболевания — все это не оказывает значимого влияния на риски ложноотрицательного результата теста на ВИЧ.

Чувствительность тестов на ВИЧ исследована и подтверждена в реальных условиях и на больших выборках, где люди принимают алкоголь, нервничают, принимают самые разные препараты, болеют различными заболеваниями, имеют самые разные отклонения лабораторных параметров.

Я сдавал общий анализ крови (биохимию печени, иммунограмму, липидный профиль), анализы в норме. Означает ли это, что у меня нет ВИЧ-инфекции?

Нет, не означает. Ни по каким анализам, кроме теста на ВИЧ, невозможно ни исключить ни подтвердить ВИЧ-инфекцию.

Я принимаю антибиотики (антидепрессанты, транквилизаторы, настой на мышиных хвостах), будет ли тест достоверен?

Будет. Никакие препараты, кроме препаратов АРТ в качестве постконтактной профилактики не влияют на достоверность теста на ВИЧ.

Я перед сдачей теста выпила стакан пива (бутылку водки, съела два торта, выкурила 5 пачек сигарет, косячок марихуаны), не повлияет ли это на результат теста?

Не повлияет.

Может быть так, что антиген уже связан антителами, а антител еще мало для теста?

Этот феномен описан, но это весьма короткоживущий феномен, по сути это точка пересечения двух условных кривых, никто вам не скажет, это часы или десятки минут, но точно не многие дни, скорее следует предполагать как максимум (предположение, для утверждения не достаточно данных) 1-2 суток. И в любом случае этот феномен, если и возникает, то находится там, где мы вообще из осторожности не говорим о полной достоверности тестирования, т.е. внутри первых 4-6 недель, и с очень высокой долей вероятности этот период внутри еще более короткого промежутка — в пределах первых двух недель, т.е. мы как бы укладываем оба окна одно в другое. Плюс, по всей видимости, есть некоторые условия, которые хоть сколько то значимыми делают вероятность «подловить» это самое второе окно — исходные иммунодефицитные состояния, например, связанные с возрастом.

Если бы доминирующие ИФА системы отдельно показывали срабатывание At или Ag линии, то мы бы знали (т.е. мы и так это знаем, но вот имели бы статистику по этому поводу), что за редким исключением выявление ВИЧ происходит по At линии, а если бы мы неким волшебным образом знали дату инфицирования, то мы бы знали, что за редким исключением мы выявляем довольно поздно, спустя многие месяцы и годы. В отдельных группах риска под влияем активных действий ситуация может чуть смещаться в сторону более раннего выявления, но это все не меняет погоды по большому счету. Т.е. реальных практических рисков феномен второго окна не несет — любой врач будет рекомендовать и принимать во внимание тестирование на тех сроках, когда с очень высокой вероятностью будет антитела в достаточных для детекции количествах.

А какие подтипы выявляет ИФА? Что если я заразился редким подтипом и тест его не видит?

Нет, такого не бывает. Современные скрининговые ИФА-системы выявят любой подтип из группы M и O. Представителей групп N и P зарегистрировано единичное число, их очень непросто найти даже в Камеруне, где их число чуть больше ноля, и измеряется единицами. Как только, с точки зрения эпидпроцесса, распространенность группы превысит хотя бы сотые доли процента, и будут обнаружены в за пределами африканской глуши хотя бы единичные пациенты, то и тест-системы официально подтянутся, вслед за нуждами — будут проведены широкие исследования и появятся группы и подтипы в технических характеристиках систем, то, что их нет там сегодня означает лишь то, что их нет официально. На данный момент рассматривать подобные сценарии нет смысла.

В 2006 году их было известно десять камерунцев с группой N, но спустя 5 лет, после тщательных просеиваний тысяч камерунцев нашли еще… четыре.

По разным оценкам от 400 до 800 тысяч камерунцев живут с ВИЧ, и мы знаем, что возможно до 0,1% являются носителями группы N. Т.е. от 400 до 800 человек на планете.

Важно: все редкие группы и подтипы ВИЧ были выявлены исходно обычным методом ИФА. То, что в технических характеристиках систем не указаны эти подтипы, говорит лишь об одно — число пациентов слишком мало, чтобы можно было бы провести стандартные исследования, для которых требуется не несколько случаев, а сотни, и официально утвердить у регулятора новые строчки в инструкции.

Я слышала, что методом ИФА ВИЧ-2 выявляется позднее, это так?

В данном случае это не имеет значения, антитела выходит на уровень достаточный для детекции примерно в одни и те же временные рамках, общие перестраховочные сроки 6-8 недель от опасного контакта «накрывают» и ситуации с ВИЧ-1 и с ВИЧ-2.

Аптечные ИФА экспресс-тесты достаточно надежны?

Экспресс-тесты на антитела к ВИЧ в США одобрены с 2002 года, в том числе ультрабыстрые тесты, чувствительность таких тестов от 93% и специфичность — от 99%. Одобренный и доступный в РФ экспресс-тест Alere Determine HIV ½ Ag/Ab Combo, значительно уступает по способности к обнаружению антигена р24 ВИЧ по сравнению с коммерческими лабораторными системами 4 поколения.

Следует учитывать, что экспресс-тесты значительно чаще лабораторных дают ложный положительный результат. Положительный прогностический результат для РФ у экспресс-тестов будет примерно 50 на 50, т.е. если экспресс-тест дает положительный результат, то в среднем, т.е. для групп низкого риска, вероятность в данном случае наличия ВИЧ-инфекции лишь 50%, и любой положительный результат обязательно требует перепроверки методом ИФА в условиях лаборатории.

Можно ли применять ПЦР РНК или ДНК ВИЧ для скрининга на ВИЧ?

Да, можно. но не не рекомендуется. Хотя за последнее десятилетие метод стал значительно дешевле и точнее, но все же он до сих пор и дорог, более длительный, и технически сложен, что предполагает большие риски ошибок. В России, так же впрочем, как и США, количественный метод ПЦР не рекомендован для скрининга и диагностики ВИЧ-инфекции в обычных случаях.

Чем отличается ПЦР ДНК от ПЦР РНК ВИЧ?

РНК обычно используется в количественных тестах для оценки вирусной нагрузки у диагностированных лиц, например для оценки эффективности терапии. ДНК — в мононуклеарных клетках, например для диагностики у детей, там, где антитела к ВИЧ матерей мешает использовать метод ИФА. И тот и другой тест могут быть и количественными и качественными. И тот и другой можно в узких случаях применить как диагностический, с учетом конкретных ограничений, которые накладывают технические параметры системы.

Я сдавал в коммерческой лаборатории анализ ПЦР РНК (или ДНК) ВИЧ, могу ли я исключить инфицирование?

Да, скорее всего можете, но вы делали это зря. Выше мы писали, что метод ПЦР не применяется для скрининга, а значит нужно делать ИФА.

Отвечал на частые вопросы равный консультант Erik Kivexa. 

Мы ответим на те вопросы, которые у вас могли остаться.

Прежде, чем задать вопрос, посмотрите, нет ли ответа на него в тексте выше и соответствует ли он теме тестирования на ВИЧ. Если есть или не соответствует, то не стоит задавать вопрос снова — он не пройдет  премодерацию.

coinfection.net

Методы диагностики ВИЧ-инфекции: сроки и достоверность исследований

Ранняя диагностика заболеваний – залог успешного лечения. Ставшее крылатым выражение, особенно актуально для ВИЧ-инфекции. Ведь заболевание неизлечимо полностью, и только своевременная диагностика позволяет взять течение болезни под контроль и выбрать тактику лечения, чтобы жить полноценной жизнью.

Ранний срок диагностики ВИЧ – со 2 недели от предположительного заражения.

Важность клинической диагностики ВИЧ

В понимании многих людей ВИЧ-инфицированный человек выглядит болезненно, изнеможенно. Он кашляет, чихает, чешется, стонет, у него все болит… На самом деле это не так! Проблема в том, что после инфицирования ВИЧ и в последующий инкубационный период симптомы полностью отсутствуют. Затем наступает острая фаза, на протяжении которой присутствуют симптомы, напоминающие ОРВИ или грипп. Но и они вскоре проходят, и наступает, так называемый, латентный период – продолжительный промежуток времени, когда ВИЧ-инфекция себя ничем не выдает. С момента инфицирования и до стадии пред-СПИДа может пройти порядка 10 лет, в течение которых, ни сам пациент, ни его окружение, даже и не подозревают о болезни. А когда она уже на полную мощность заявляет о себе, контролировать ее очень трудно. Сложно противостоять осложнениям ВИЧ, поддерживать практически разрушенную иммунную систему человека.

Очень важно понимать, что, хотя и есть группы риска – гомосексуалисты, наркозависимые и девушки легкого поведения – в основной массе, пациенты с ВИЧ-инфекцией – это обычные люди. Они учатся, ходят на работу, посещают общественные места, знакомятся в интернете – в общем, живут как все. К сожалению, но от ВИЧ никто не застрахован. Незащищенный половой контакт в порыве страсти, заветное тату без соблюдения стерильности, маникюр за полцены у начинающего мастера, уличная драка – все эти и множество других житейских ситуаций могут обернуться инфицированием ВИЧ.

Не ошибается лишь тот, кто не живет! Мы не можем знать все наперед, не можем исправить уже совершенных ошибок, но мы можем предпринять простые шаги для исправления их последствий – обратиться в ближайший кожно-венерологический диспансер, в местную клинику или специализированный СПИД-центр для сдачи анализов и ранней диагностики ВИЧ.

Благоприятные сроки для диагностики ВИЧ

Факт возможного инфицирования и плохое самочувствие без видимых причин – два веских основания для обращения к специалистам. Но отрицательный результат тестирования на антитела не всегда означает, что человек не инфицирован, так как существует период “серонегативного окна” (время между заражением и появлением антител), который составляет около трех месяцев. Поэтому лучше повторить их спустя 3 месяца с момента возможного инфицирования. Если же ответ опять будет отрицательным, но ваша тревога не проходит, и вы уверены в заражении ВИЧ, тогда лабораторную диагностику необходимо повторить спустя 6 месяцев после факта заражения.

Что касается плохого самочувствия, то поводом провериться на ВИЧ может быть сочетание следующих симптомов:

  • увеличение лимфатических узлов на шее, в паху, в области подмышек;
  • лихорадка;
  • мышечные или головные боли;
  • молочница и грибковые поражения, в том числе кандидоз полости рта;
  • воспаление слизистой носа, рта или глотки;
  • ночная потливость;
  • ломота в суставах;
  • длительная диарея;
  • тошнота, рвота;
  • резкое снижение массы тела;
  • высыпания на коже.

Важно понимать, что с момента, когда проявляются первые признаки ВИЧ-инфекции и до момента, когда заболевание переходит в латентную стадию, проходит очень мало времени – около 3-6 недель с факта инфицирования. Нельзя упускать из вида этот промежуток времени! Поскольку последующие 8-10 лет вы будет жить, нормально себя чувствовать и даже не подозревать о том, что больны ВИЧ-инфекцией. Драгоценное время будет упущено.

Современные методы диагностики ВИЧ

В настоящее время в диагностике ВИЧ используется двухуровневый подход – косвенные и прямые тесты. Косвенные тесты позволяют обнаружить в крови пациента специфические антитела к ВИЧ, а прямые тесты помогают выявить собственно сам ВИЧ и определить степень вирусной нагрузки на организм. В России стандартная диагностика ВИЧ включает следующие методы лабораторных исследований:

  • ИФА (иммуноферментный анализ).
  • Иммуноблот (иммунный блоттинг).

Также могут быть применены следующие методики:

  • Экспресс-тест ИХА (иммунохроматография).
  • ПЦР (полимеразная цепная реакция).

Диагностические принципы лабораторных исследований и степень их достоверности приведены в нижеследующей таблице.

Метод исследования

Диагностический принцип

Достоверность

Время после заражения

Экспресс-тест ИХА

Выявление антител к ВИЧ

93-99%

с 3 недели

Скрининговый тест ИФА

Выявление антител к ВИЧ и антигенов вируса

Иммуноблот

Антитела к нескольким белкам ВИЧ

99,9%

с 5 недели

ПЦР

Исследуется генетический материал вируса

80%

с 5 дня

98%

со 2 недели

При проведении исследований важно использовать сверхточное оборудование и верно интерпретировать результаты анализов. В противном случае точность диагностики снижается. При этом специалисты считают, что рациональнее всего проводить исследования в следующей последовательности.

  1. Сначала экспресс-диагностика, основанная на методе ИХА.
  2. В случае положительного результата – еще один анализ крови по методу ИФА.
  3. Положительный второй результат – проводится дообследование методом ИФА или иммуноблоттингом.
  4. В исключительных случаях для окончательной постановки диагноза можно применить более сложный и дорогостоящий метод ПЦР.

Экспресс-тесты методом ИХА или скрининг ИФА,  предполагающий серологическое иммуноферментное исследование крови, выполняются в течение 15-30 минут. Высокая скорость диагностики актуальна в неотложных случаях, при планировании срочных операций. Но для постановки окончательного диагноза необходимо использовать основной метод диагностики – иммунный блоттинг. Если результаты ИФА и иммунного блоттинга противоречат друг другу, то возможно проведение референс диагностики – анализ сразу двумя методами. К проведению ПЦР прибегают в исключительных случаях, т.к. это наиболее дорогостоящий метод исследования. Далее разберем каждый из методов диагностики более подробно.

Экспресс-тест ИХА

Иммунохроматографические тесты неплохо зарекомендовали себя в экспресс-диагностике ВИЧ. Визуально они выглядят как полоски, на поверхность которых наносят исследуемый биологический материал (кровь, слюна). Для получения результата потребуется всего 10-15 минут, по истечении которых на тесте проявится, или цветная и контрольная полоска – положительный результат, подтверждающий наличие антител к ВИЧ, или только контрольная полоска – отрицательный результат.

С недавнего времени американская компания OraSure Technologies наладила массовое производство экспресс-тестов для домашнего применения. Они отпускаются без рецепта, и при желании их может использовать каждый желающий. Однако необходимо учесть, что по точности диагностики ИХА уступает методу ИФА, а для постановки окончательного диагноза необходимо проведение иммуноблота.

Скрининговый тест ИФА

Принцип метода основан на способности искусственно созданных белков ВИЧ, улавливать вырабатывающиеся в организме человека специфические антитела. В результате взаимодействия, тест-система ИФА изменяет окрас индикатора. Полученные изменения цвета обрабатываются с помощью аппаратуры, которая выдает результат анализа. При этом необходимо учесть, что скрининговый тест предназначен для выявления не ВИЧ как такового, а антител к нему. А поскольку для их появления в организме, необходимо время, то целесообразнее всего проводить скрининг спустя 3-6 недель после факта возможного инфицирования. Для этого достаточно всего 5 мл крови из вены пациента, забор которой проводят натощак, т.е. спустя 7-8 часов после последнего приема пищи.

Помимо положительного или отрицательного результата, тест ИФА может дать ложноположительный или ложноотрицательный результат.

  • Ложноположительный – речь может идти об сходных по своей структуре антителах, которые вырабатываются в организме при аутоиммунных заболеваниях, множественных миеломах, алкогольном гепатите и других патологиях.
  • Ложноотрицательный – скорее всего, тестирование было проведено преждевременно или иммунная система слишком слаба и не вырабатывает антитела к ВИЧ.

При сомнительном результате тест проводится повторно.

Иммунный блоттинг

Иммуноблот – это основной метод диагностики ВИЧ, сочетающий иммуноферментный анализ (ИФА) с предварительным электрофоретическим переносом на нитроцеллюлозную полоску антигенов вируса. Для их выявления анализ проводят в три этапа:

  • подготовка нитроцеллюлозной полоски;
  • исследование пробы биологического материала пациента;
  • трактовка результата.

Таким образом, в ходе проводимого исследования, основные белки ВИЧ распределяются по поверхности в виде отдельных полос, которые проявляются при проведении иммуноферментной реакции и подтверждают наличие или отсутствие антител к антигенам ВИЧ. Полученные в ходе исследования иммунным блоттингом результаты считаются окончательными.

Полимеразная цепная реакция (ПЦР)

Главное отличие ПЦР от других методов диагностики – тест-система определяет ДНК вируса. С ее помощью можно выявить даже единичные вирусные частицы. Применение метода возможно уже на 5ый день после факта возможного инфицирования с точностью до 80%, что позволяет провести раннюю диагностику ВИЧ. Однако ПРЦ проводят только в исключительных случаях.

  • для постановки диагноза новорожденным, появившимся на свет от ВИЧ-инфицированных матерей;
  • при сомнительных результатах иммуноблота;
  • для оперативного исследования донорской крови;
  • для оценки уровня ВИЧ в крови инфицированного пациента.

Несмотря на высокую чувствительность метода ПЦР, он обладает меньшей диагностической чувствительностью к ВИЧ, что объясняется вариабельностью генома вируса. Поэтому для постановки окончательного диагноза данный метод не используется.

Новые и альтернативные методы диагностики ВИЧ

Недавно, сотрудниками Питтсбургского университета был разработан новый высокочувствительный тест для обнаружения скрытых вирусов – тест TZA. Для его проведения требуется меньше времени и крови пациента. Принцип действия TZA сводится к поиску гена, который активируется только при репликации вируса. Несмотря на то, что разработчики уверены в эффективности теста, большинство специалистов склоняется к тому, что TZA не сможет заменить существующие методы диагностики полностью, поскольку он характеризуется иным механизмом действия и не подходит абсолютно каждому ВИЧ-инфицированному пациенту.

Где и как можно пройти диагностику ВИЧ

Сегодня тест на ВИЧ-инфекцию не является проблемой. При желании пациента, кровь на анализ можно сдать анонимно и абсолютно бесплатно. Сделать это можно в медицинских организациях по месту жительства, в Свердловском областном центре профилактике и борьбы со СПИД (г. Екатеринбург, ул. Ясная, 46. Регистратура: (343) 383-30-18 Телефон доверия по проблеме ВИЧ/СПИД: (343) 310-00-31 (будни, с 9 до 20 часов).

Диагностика ВИЧ – дело сугубо добровольное. Однако есть четыре ситуации, для которых прохождение теста является обязательным:

  1. Донорство.
  2. Трудоустройство на работу, предполагающую непосредственный контакт с биоматериалом, который может содержать ВИЧ.
  3. Иностранные граждане.

Лица при призыве на военную службу, поступающие в военные учебные заведения.

Но и в этих случаях тестирование не может проводиться насильно, поскольку для любого медицинского вмешательства необходимо добровольное и осознанное согласие пациента. Именно осознанное, поскольку каждый из нас должен понимать важность своевременной диагностики ВИЧ.


profilaktica.ru


Смотрите также